(Penicillium roqueforti var. carneum), Penicillium roqueforti được phân loại thành
ba loài là Pencillium roqueforti, Penicillium carneum và Penicillium paneum.
III. ĐẶC ĐIỂM
1. Đặc điểm hình thái
5
Hình ảnh Penicilium roqueforti
Penicilium roqueforti là loại mốc có màu xanh, có cuốn đính bào từ, sinh bào
tử, sinh sản hữu tính, hình sợi, thuộc ngành nấm nang.
6
Qúa trình hợp giao tử (A – F) ; Toàn giao (Hologamy)(G – J); Tiếp xúc
giữa 2 giao tử (K– L); Tự giao (autogamy)(M – N: sinh sản ở nấm mốc.
2. Đặcđiểm bào tử
Bào tử của nấm mốc Penicilium
roqueforti : hình cầu gần như
hình tròn, bề mặt tròn nhẵn(kích
thước 3,5- 5,5 µm), không có
màng tế bào.
Cuống dài 100-200 x 4-5,5,….
Khuẩn lạc Penicilium roqueforti
3. Môi trường sống
Đặc điểm trên môi tổng hợp:
7
Bào tử Penicilium roqueforti
Hình ảnh
P.roqueforti
Penicillium roqueforti chỉ là một loài của Penicillium mà nó có thể phát triển
trên môi trường chứa 0-5% acid acetic, ở nồng độ rượu cao, và ở nồng độ oxy thấp
(nói rõ trong phần sau). Khuẩn lạc trên môi trường Czapek thạch và MEA 25
o
C
phát triển rất nhanh chóng, đường kính đạt 4-5 cm, trong vòng 14 ngày, các bào tử
có các cuống mọc dày đặc, mượt, Màu xanh xanh, sau đó trở nên tối hơn. Dịch tươi
do loài này tiết ra trong như giọt pha lê. Mùi không rõ nét. Sau đó môi trường thay
đổi màu sắc từ màu xanh sang xanh đậm. Cuống bào tử đính kích thích 100-200 x
4,0-6,5 μm. Hạt bào tử đính trong cột lỏng lẻo,hình cầu, màu xanh lục, nhẵn-tường,
chủ yếu là từ 4-6 mm, có khi đến 8mm.
Phân bố trong tự nhiên:
Roqueforti Penicillium là một loại nấm hoại sinh phổ biến , nó thì tồn tại
khắp nơi trong tự nhiên và có thể được phân lập từ đất, các chất hữu cơ phân hủy và
các bộ phận của cây Ngoài ra, chúng được tìm thấy trong ẩm ướt, hầm tối, đến
vườn đất và tán lá, mà còn trong phòng tắm, nước, đường ống, con dấu cao su,
ngưỡng cửa sổ, thảm, nệm và đồ nội thất…
4. Tốc độ phát triển
Tốc độ phát triển nhanh trên các môi trường và đạt kích thước sau: CYA:
34-55mm, MEA: 35-56 mm, YES: 47-74 mm. Khuẩn lạc của Penicilium roqueforti
phát triển rất tốt trên môi trường acid acetic : 0,5%, và cũng phát triển tốt trên
CREA thích hợp trên môi trường acid.
IV. ĐẶC TÍNH SINH HOÁ
1. Sinh hợp chất thứ cấp
1.1. Penicilium roqueforti là loài sinh ra hợp chất thứ cấp marcfortines
và fumigaclvine A.
8
Những tư liệu về những hợp chất này tạm thời chưa được rộng nên khó khăn trong
việc lấy nó làm tư liệu.
1.2. Độc tố PR và eremofortin C
Là chất chuyển hóa thông thường của Penicilium roqueforti. Các cấu trúc
hóa học của hai hợp chất liên quan chặt chẽ với nhau và khác nhau chỉ bởi một
aldehyde và một nhóm acohol tại vị trí C-12 .
Định tính, định lượng độc tính enzyme:
Các hoạt động tối đa các enzym trong các môi trường đã được tìm thấy vừa
xảy ra vào ngày 13 tính từ khi bắt đầu thí nghiệm, trong đó tương ứng cực đại của
PR trong vật chứa độc tố. Enzyme này được phân lập và tinh chế từ các môi trường
và vừa khuẩn ty thể của nấm tương ứng thông qua một thao tác liên quan đến amoni
sulfat và fractionation DEAE-cellulose sắc ký.
Sản lượng đã được 33,3 và 21,6% cho các enzym có hoạt tính trung. Độ pH
tối ưu cho enzym khi pH 5,6. Khi nó xúc tác sự chuyển đổi ở 30 ° C và phân rã với
thời gian phản ứng khi ở nhiệt độ cao. Ở 100 ° C, hoạt động của enzyme đã hoàn
toàn bị mất. Các K. và Vmax của các enzym như được xác định ở 30 ° C là 0,02
mM và 4.0, umol / phút mỗi mg, tương ứng. Trọng lượng phân tử của enzyme đã
9
Marcfortines từ Penicilium roqueforti
được ước tính bằng cách lọc ,áp suất sắc ký lỏng thu được là I-250 protein đến
40.000. Độc tố PR và eremofortin C (EC) là chất chuyển hóa thứ cấp của nấm
Penicillium roqueforti, những độc tố này gây nguy hiểm cho những người sử dụng
sản phẩm phomat bị nhiễm penicilium roqueforti.
Hình: phân tích chất độc bằng phương pháp HPLC . sự hoạt động của độc
tính trong Penicilium roqueforti.
Kể từ khi phát hiện và cô lập PR độc tố , nó làm sáng tỏ độc tố nấm mốc con
đường tổng hợp sinh học của các độc tố khác có liên quan và chuyển hóa qua lại lẫn
nhau.
Cấu trúc của PR :
10
2. Oxy hoá các acib béo
Khả năng của nấm để ôxi hóa của các axit béo chuỗi trung bình được thu
Ketones methyl lần đầu tiên được ghi nhận, người đã cho thấy Penicillium
roqueforti và hai loài của chi Aspergillus sản xuất Ketones methyl khi nuôi vi nấm
11
Công thức một số loại chất độc do Penicilium roqueforti sinh tổng hợp
trong vài tuần trong môi trường acid béo. Năng lực của các bào tử của P. roqueforti
để tạo Ketones methyl nhanh chóng biến mất dần dần khi bào tử nảy mầm.Tỷ lệ sự
hình thành của 1-2-heptan trong những axít octanoic do sự không hoạt động
P.roqueforti đã được tăng lên đáng kể bằng cách thêm những axít amin và đường
khi kích thích nảy mầm của các bào tử.
Phương pháp:
Gehrig & Knight (1963) đã tăng trưởng của khuẩn ty thể Penicillium roqueforti trên
phương diện hóa học trong đó có cả acetate và oleate. Ban đầu ở pH 4,0 thể khuẩn
ty ở pH 4,0 lần ít hoạt động trong ôxi hóa axít béo hơn khoảng 5 sự phát triển ở pH
6,5.
Môi trường
Ammonium nitrate, 2 g. ; Magiê sulfat (MgSO,. 7H, O), 0,1 5 g. ; Kali
clorua, 0,25 g. ; Sắt sulfat (FeSO,. 7H20), 0,0125 g.
Tăng trưởng của khuẩn ty thể:
Bào tử của Penicillium roqueforti đã được nhân giống trên môi trường Czapek-Dox
agar (Oxoid) . Sau 5-6 ngày các bào tử đã được chuyển giao cho 100 ml của trung
bình trong 500 ml trong Erlenmeyer Flasks. Việc nhân giống được ủ qua đêm, để
cho phép bào tử nảy mầm trong 24 giờ. Nồng độ của khuẩn ty thể pha trộn đã được
điều chỉnh để khoảng 10 mg. / ml. Wt khô, nồng độ chính xác được
xác định bằng cách đo lường trọng lượng khô.
12
Hình 1: Sự hấp thu oxy ở pH 5,2 do khuẩn ty thể của roqueforti Penicillium
ủ với
axít béo. Phản ứng các điều kiện: Iomg. khô wt equiv. khuẩn ty thể, thu hoạch sau
khi 66h.
Hình 2: Các ức chế hấp thu oxy bằng cách bổ sung của C, hoặc C, các axit
béo để khuẩn ty thể của Penicillium roquefortiincubated với axít béo
Kết quả:
Ảnh hưởng trung vào khả năng tăng trưởng của khuẩn ty thể để ôxi hóa axít
béo . Sản lượng của Ketones methyl thấp từ axit béo đã thu được với khuẩn ty thể
trồng trong các axit Casamino (3 g./500 ml).
3. Độc tính:
Penicilium roqueforti sinh độc tố roquefortine. Độ độc thấp của roquefortine C đã
được tìm thấy trong pho mát xanh nhưng nồng độ chính xác đã không báo cáo.
Scott và Kennedy (1976) tìm thấy nồng độ roquefortine lên đến 6,8 mg / kg trong
các mẫu phó mát xanh trên thị trường mà họ kiểm tra. Trong thực tế,độc tính
roquefortine tạo ra bởi hầu hết các chủng của P. roqueforti được phân lập từ phô
mai xanh. Một tỷ lệ nhỏ các chủng tìm thấy từ thịt cũng tạo ra roquefortine.
Khả năng gây bệnh của Penicillium roqueforti là rất thấp, thậm chí là ít cơ
hội gây bệnh. Giá trị LD50 của roquefortine khoảng 10 mg / kg được thử nghiệm
trên chuột. Cho bò ăn ngô bị nhiễm P. roqueforti làm bò biếng ăn, và viêm đường
ruột .
Con người tiếp xúc độc tính đó qua da và đường hô hấp và tiêu hoá
Một trường hợp được Campbell et al (1983) mô tả về một bệnh nhân làm việc tại
một nhà máy, nơi pho mai xanh được sản xuất bằng cách sử dụng. Penicillium
roqueforti. Triệu chứng là ho, khó thở, khó chịu, thể tích phổi giảm. Penicillium
Roqueforti có thể gây ra phản ứng dị ứng như sổ mũi, ho, hắt hơi, nổi mề đay, hoặc
bệnh suyễn Không có bằng chứng để kết luận độc tính roquefortine có khả năng
gây ung thư.
V. ỨNG DỤNG
Sản xuất poliscchacarides, sản xuất hợp chất thứ cấp,….
13
1. Sản xuất Exo-polygalacturonase (Exo-p):
Dựa trên môi trường kem dầu bí ngô (PuOC ) kết hợp bổ sung lúa mì, cám
(WB), và vi nấm mốc Penicilium roqueforti, nhằm thực hiện quá trình lên men bề
mặt bán rắn SSF.
Hình trên cho thấy : Khả năng tổng hợp của Penicilium roqueforti sản sinh
Exo- P, trên môi trường PuoC. Exo-P tăng từ đầu quá trình và đạt những giá trị tối
đa là 1452U/g.d.w.
2. Sản xuất protease trong sản xuất phomat xanh, Roquefort,
Stilton
Khả năng tổng hợp protease có khả năng đông tụ sữa sử dụng trong sản xuất
các sản phẩm lên men từ sữa và protein
2.1. Phomat xanh(Stilton):
Stilton là một pho mát kem với làn vân màu xanh, và nó có một hương vị đặc
trưng, với khả năng chống oxy hoá. Stilton là một loại phomat làm từ sữa tiệt trùng.
Sữa được bổ sung nấm mốc roqueforti, thêm muối và không ép khuôn để sản phẩm
có kết cấu lỏng lẽo, để nấm mốc phát triển tự nhiên ăn lan thành các đường vân
trước khi thành phẩm.
14
Không có nhận xét nào:
Đăng nhận xét